注重信息： 预期用途： 主要用于免疫组织化学染色的显色。 存储要求： 2～8℃避光保存，不得冻存；产物灵验期为12个月。 测验旨趣： 响应增强液促使增强酶标山羊抗小鼠IgG团聚物与辘集在组织片上的一抗响应形成免疫复合物，团聚物上的HRP催化底物H2O2与DAB（或AEC）响应，最终形成棕褐色（或红色）不溶性色原，从而在显微镜下线路出组织片中的特定抗原的位点。 试剂盒本体： 包装规格： 3mL 6mL 18mL 试剂1：内源性过氧化物酶阻断剂 3mL 6mL 18mL 试剂2：响应增强液 3mL 6mL 18mL 试剂3：增强酶标山羊抗小鼠IgG团聚物 3mL 6mL 18mL 适用仪器： 手工操作，机器染色 测验形态： 1、测验所需仪器、开辟：移液器、恒温箱、树立仪、免疫组化笔、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶。 2、试剂准备：显色液需要在使用前配制。 3、操作范例： a) 脱蜡和水化 石蜡切片置于簇新二甲苯中，浸泡10分钟×3次；去除弥散的液体后，置于无水酒精中，浸泡3分钟×3次；去除弥散的液体后，置于95%酒精中1314酒色网，浸泡3分钟×2次；去除弥散的液体后1314酒色网，置于75%酒精中1314酒色网，浸泡3分钟×2次；蒸馏水冲洗1分钟，置于PBS缓冲液中。 b) 抗原树立，参见一抗施展书。 c) 阻断内源性过氧化物酶 加入适量的内源性过氧化物酶阻断剂，室温孵育10分钟；PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。 d) 滴加一抗 左证组织大小，滴加100μL或适量的一抗，37℃孵育60分钟；PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。 e) 滴加响应增强液 滴加100μL或适量的响应增强液，室温孵育20分钟；PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。 f) 滴加增强酶标山羊抗小鼠IgG团聚物 滴加100μL或适量的增强酶标山羊抗小鼠IgG团聚物，室温孵育20分钟；PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。 g) DAB显色 加入适量簇新配制的DAB或AEC显色液，室温孵育5～8分钟。 h) 复染 自来水冲洗，苏木素染色液孵育20秒；分化、冲洗返蓝。 i) 脱水、透明、封片 j) 阅片。 4、抛弃判定，染色抛弃须由有禀赋的病理大夫对染色后的组织片在光学显微镜下不雅察并进行判读。 测验抛弃的解说： 1、抗原树立、孵育技巧、温度的修改或使用其他形态均有可能导致无理抛弃。 2、在每一次染色过程中，必须有空缺对照和阴性对照推行同期进行。 3、要是阳性组织对照不成线路恰当的阳性染色，应判定该批次样本的检测抛弃无效。 4、若响应增强液或增强酶标山羊抗小鼠IgG团聚物孵育温渡过高或孵育技巧过长，可能导致染色过强及布景染色。 测验形态的局限性： 1、免疫组织化学染色是一种需通过多个操作形态完成的检测过程，在组织前期处理和推行过程中的不范例操作，有可能影响推行抛弃。 2、专科的操作主谈主员、经过认证的推行室和模范化的推行经由，不错减少多样外界身分形成的操作偏差。 3、红细胞和细胞色素C可能会形成假阳性抛弃。 4、阴性甩腕默示未检出抗原，不一定默示样本中无该抗原存在；待测抗原编码基因变异、抗原低抒发或抗原树立不当等，王人会形成抗原无法检出。 5、本试剂仅对10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋的组织进行了考证，不作其他用途。 产物质能诡计： 1、装量：试剂盒各组份的溶液装量应不少于标示装量。 2、相宜性：取相宜性组织片（包括阳性组织对照和阴性组织对照），经相应的免疫组化推行后，应阳性着色定位准确，且无布景染色；同期，空缺对照和阴性对照染色抛弃为阴性。 3、批内叠加性：取兼并批次的试剂盒，检测组织片3片，染色强度和定位无显豁互异。 提神事项： 1、本染色液仅用于免疫组化，不作念其他用途。 2、本染色液仅限专科东谈主员使用。掌握恰当的防护递次，以幸免试剂同皮肤和眼睛战役。 3、染色液中的DAB底物液为致癌物资，操作中应继承合理的防护递次。 4、提升灵验期的试剂活性可能缩短，因此不得使用过时的试剂盒。 5、脱蜡无间对，容易影响染色后果，冷落免疫组化切片脱蜡与惯例HE脱蜡分开。 6、为防范可能出现的假阳性、假阴性抛弃，在推行过程中需树立阳性与阴性对照。 7、推行中滴加试剂时，过多的PBS缓冲液会导致试剂被稀释，将引起染色强度变弱，因此，滴加试剂前应猬缩弥散的缓冲液。 8、使用中所产生的多样捣毁物王人应按《医疗废料处置条例》处理。
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